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納米抗體

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納米抗體

納米抗體(Nanobody,Nb), 即重鏈單域抗體VHH (variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody),是由比利時科學家于1993年在自然雜志中報道,是駱駝科動物(駱駝,大羊駝,羊駝及其近親物種)缺失輕鏈的天然重鏈抗體的可變區(VHH)組成的單域抗體,該抗體只包含一個重鏈可變區(VHH)和兩個常規的CH2與CH3區。 VHH晶體為直徑2.5nm、長4nm的圓柱體,分子量只有15 KDa,因此也被稱作納米抗體(Nanobody, Nb)。

圖片來源:International Journal of Nanomedicine 2016:11 3287–3303

納米抗體特點

得益于納米抗體微小的結構、完整的抗原識別能力以及噬菌體篩選技術,納米抗體表現出高親合力、高特異性、強穿透性和易于基因改造和表達等特點,并且由于可以獲得抗體完整序列,納米抗體可以通過體外重組表達高質量穩定生產,有效避免傳統抗體的批次間差異問題。納米抗體的物理和化學穩定性,可為診斷和治療提供新的研究工具,在抗體藥物研發、醫學基礎研究以及疾病診斷、癌癥和感染性疾病治療等領域展現出了廣闊的應用前景。

  • 與靶點結合特異性更強

  • 組織穿透力更強

  • 開發周期短,穩定性更高

  • 制備簡單,適合工業化大規模生產

  • 可在微生物中高效大量表達

  • 更容易人源化

納米抗體研發技術加速服務平臺

耀海生物擁有豐富的納米抗體研發及生產經驗,以強大的技術平臺、先進的生產設備以及在納米抗體全生態表達系統的開創性技術,致力于為客戶提供從菌株構建、多功能納米抗體表達與純化,及規模化生產的一站式納米抗體研發生產服務,滿足客戶不同實驗或項目需求。

  • 全生態重組表達系統

    E.coli 原核表達系統
    酵母真核表達系統(畢赤酵母)
    哺乳動物細胞表達系統

  • 多樣化納米抗體類型

    單域納米抗體、二價納米抗體、多價納米抗體

  • 成熟完善純化平臺

    齊全純化平臺,組合式純化方式,高效靈活

  • μg至kg

    納米抗體較高表達量10g/L
    服務規模7-2000L

目前,耀海生物建立了全生態的納米抗體表達體系,現有的表達系統包括:E.coli 原核表達系統、酵母表達系統(畢赤酵母)、哺乳動物細胞表達系統(科研級樣品制備),熟練運用多種表達宿主菌,根據客戶的實際需求,為客戶提供適合且高質量的表達體系。

20+品質開發經驗積累
不同大腸桿菌宿主靈活選擇
不同表達載體高效選擇
10+品種開發經驗儲備
不同畢赤酵母宿主靈活選擇
PAOX1甲醇誘導表達系統
PGAP組成型表達系統
5+品種納米抗體開發經驗
瞬轉表達納米抗體
穩轉株表達納米抗體
E.coli 原核表達系統
酵母表達系統(畢赤酵母)
哺乳動物細胞表達系統
E.coli 原核表達系統

大腸桿菌表達系統是基因表達技術中發展早、應用廣且經濟實惠的經典表達系統。大腸桿菌具有遺傳背景清楚、細胞增殖快、表達量高、穩定性好和抗污染能力強等特點。

納米抗體的分子質量小、結構簡單,能被單個基因編碼,利用基因工程能在大腸桿菌等原核微生物中大量表達。

耀海生物可以利用大腸桿菌在胞質或者通過信號肽周質空間表達納米抗體,成功表達的納米抗體種類超20種。

酵母表達系統(畢赤酵母)

酵母表達系統,是工業生產中應用較為廣泛的系統,其遺傳背景清楚安全,兼具原核和真核表達系統的優點:增殖快、可在廉價培養基中進行高密度發酵、能進行復雜的翻譯后修飾、且分泌表達能力強大,有效降低下游純化成本。納米抗體的分子質量小、結構簡單,能被單個基因編碼,利用基因工程能在酵母菌等微生物中大量表達。

耀海生物可提供納米抗體高表達菌株的篩選與發酵工藝開發服務,采用高密度發酵,利用畢赤酵母PAOX1誘導表達納米或PGAP組成型表達10余種不同納米抗體,表達量可達到10 g/L以上。

哺乳動物細胞表達系統

哺乳動物細胞表達系統能夠指導蛋白質的正確折疊,提供復雜的N型糖基化和準確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能,因而表達產物在分子結構、理化特性和生物學功能方面,接近于天然的高等生物蛋白質分子。

耀海生物可利用哺乳動物細胞CHO系列細胞,通過瞬轉方法或構建穩轉株來表達多種不同納米抗體。利用CHO系列細胞瞬轉表達納米抗體,表達量可達20mg/L;利用CHO系列細胞穩轉株表達納米抗體,表達量可達15mg/L。

納米抗體表達服務內容

由客戶提供納米抗體基因序列或氨基酸序列,自主選擇表達宿主細胞,耀海生物提供從基因合成至納米抗體表達與純化、及規模化生產的一站式納米抗體研發生產服務。

步驟 服務內容 周期 交付
納米抗體表達工程菌構建(可以選擇畢赤酵母,大腸桿菌或者哺乳動物細胞)


1.大腸桿菌表達系統(胞質或周質空間表達)


2.畢赤酵母表達系統(可以選用甲醇誘導型表達系統PAOX1或者組成型表達系統PGAP)


3.哺乳動物表達系統(通過瞬轉或者穩轉來表達納米抗體)


大腸桿菌1-2周(不包括基因合成周期)
畢赤酵母2-3周
哺乳動物瞬轉1-2周 穩轉株2個月左右
純化得到的納米抗體,純化抗體檢測報告SDS-PAGE,SEC-HPLC(選做)、RP-HPLC(選做)和CE-SDS(選做)純度分析方法
小量表達純化(標簽) 對構建的工程菌納米抗體表達,對1L表達體積的蛋白進行純化(推薦加標簽)。 2-3周
大規模表達純化 大規模發酵納米抗體樣品,同時對于發酵的納米抗體進行表達純化。 5-8周
服務優勢
  • 經驗豐富

    成熟的納米抗體表達純化平臺,以豐富的技術及項目經驗,提供一站式服務。

  • 專家團隊

    強大的技術服務團隊,具備豐富生物學技術背景,以博士為主導的表達純化平臺,提供一對一專項技術服務。

  • 全域表達平臺

    具備穩定的原核細胞E.Coli 、真核畢赤酵母及哺乳動物細胞CHO等納米抗體表達平臺,客戶可根據需求靈活選擇表達平臺,減少試錯成本。

  • 完備質量體系

    具備深厚納米抗體質量評價體系經驗,建立SDS-PAGE、SEC-HPLC、RP-HPLC及基于毛細管電泳的CE-SDS等多種純度分析方法。

  • 高效捕獲純化體系

    豐富納米抗體純化經驗,積累親和層析、離子層析、疏水層析等多種純化方式,可對不同純化方案靈活組合,實現純度≥98%。

  • 大規模生產

    可提供7-2000L的服務規模。

服務案例
利用微表達生產不同納米抗體
服務案例
利用微生物表達不同納米抗體
利用畢赤酵母表達一價納米抗體
利用畢赤酵母表達二價納米抗體
利用畢赤酵母表達三價納米抗體
納米抗體純化體系
服務案例
納米抗體純化體系
通過對protein A親核層析,對納米抗體進行純化。
根據PAGE膠檢測結果,純化得到納米抗體純度為90%以上。
通過對離子層析,對納米進行純化。
根據PAGE膠檢測結果,純化得到納米抗體純度為95%以上。
納米抗體質量評價體系
服務案例
利用微生物生產不同納米抗體
通過SDS-PAGE、SEC-HPLC對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到95%以上。
通過SEC-HPLC對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到99%以上。
通過CE-SDS對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到98%以上。
定制服務-在線詢價
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